梯度PCR基因擴(kuò)增儀每個孔的溫度可以在一定范圍內(nèi)按照梯度設(shè)置，根據(jù)結(jié)果迅速摸索出合適的反應(yīng)條件。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，可節(jié)省試驗(yàn)時間、提高實(shí)驗(yàn)效率，又節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。
PCR技術(shù)是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于在幾個數(shù)量級上擴(kuò)展一段DNA的一個或幾個拷貝，復(fù)制數(shù)千到數(shù)百萬個DNA序列。作為一種廉價但可靠的方法，能夠重復(fù)復(fù)制DNA的聚焦片段。今天，上海睿玥實(shí)驗(yàn)器材小編以梯度PCR基因擴(kuò)增儀為例就為大家簡單介紹一下具體的操作方法。
一、操作規(guī)程
1、打開梯度PCR基因擴(kuò)增儀的熱蓋，插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。
2、打開儀器的電源，儀器程序開始初始化，需等待幾分鐘。
3、初始化完成后，顯示主菜單。
4、觸摸任何區(qū)域，彈出編輯界面。
5、新建一個PCR程序，點(diǎn)“NewProtocol"，點(diǎn)“Insert'，添加步驟。
6、設(shè)置循環(huán)數(shù)、溫度、時間，點(diǎn)“Options”進(jìn)行循環(huán)次數(shù)、溫度或時間位置，依次輸入數(shù)值，出現(xiàn)合適數(shù)字后，點(diǎn)“OK”確定。
7、點(diǎn)“Run”運(yùn)行。
8、點(diǎn)“Browse/NewMethods”預(yù)覽界面，查看程序。
9、點(diǎn)“StartRun”查看近期使用文件夾，可快速重復(fù)運(yùn)行20個程序。
10、點(diǎn)“New”進(jìn)入主文件夾，查看標(biāo)準(zhǔn)預(yù)設(shè)程序。
二、注意事項(xiàng)
1、注意梯度PCR基因擴(kuò)增儀的使用環(huán)境條件和電源。不宜在潮濕、暴曬環(huán)境中使用，遠(yuǎn)離水源、明火及腐蝕性物質(zhì)。工作室溫15-25℃，保證通風(fēng)散熱。電源電壓不能波動太大，以免損壞機(jī)內(nèi)器件。
2、機(jī)蓋開關(guān)要輕，以防損壞蓋鎖。
3、嚴(yán)禁工作時打開機(jī)蓋。
4、定期用中性肥皂水清洗樣品槽，嚴(yán)禁使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑擦洗。
